오일제제, 유황제제를 활용한 고추, 토마토 해충방제 효과

남춘우1* ․ 조영상2 ․ 문희자1 ․ 안세웅1 ․ 서태철1 ․ 전희1

국립원예특작과학원1 ․ 자연을닮은사람들2

Effect of insects control with preparation of oil·sulfur in Pepper and Tomato

Chun Woo Nam1* ․ Young Sang Cho2 ․ Hee Ja Moon1 ․ Se Woong An1․

Tae Cheol Seo1 ․ Hee Chun1

National Institute of Horticultural ＆ Herbal Science, RDA, NongSaengMyeong-Ro 100, WanJu-Gun 55365, Korea1

JaDam, Techno 2ro, YuSeong-Gu, DaeJeon 34025, Korea2

Abstract. This experiment was carried out to determine optimal concentration of organic material for the pest control in pepper and tomato. The control of aphids and Oriental tobacco budworm(OTB) was examined one day later for the control of OTB and aphids in the pepper "Super Manidda" after spraying with sulfur preparations(300, ~600 fold), and the oil preparations(50~300 fold), sulfur preparations+oil preparations, oil preparations+ginkgo leaf extracts, sulfur preparations+oil preparations+ginkgo leaf extracts, sulfur preparations+oil preparations+ginkgo leaf extracts. The OTB were completely controlled after 3 treatments at high concentration of sulfur+oil(400+100 fold), and the more aphids emerge in the control, but after 3 treatments oil preparations+ginkgo leaf extracts(100+100 fold) were completely controlled such as the high concentration treatment. The Oil and the sulfur preparations should be prevented at low concentrations when insect pests are not emerge, and then sprayed at high concentrations when insect pests are emerged in pepper test. The greenhouse powder of tomatoes was completely controlled by controlling three times, but it was considered that continuous control at intervals of 1-3 days was favorable in tomato test. As a result of periodically controlling the occurrence of greenhouse powdery mildew, which is a high temperature insect pest, several moths of OTB did not occur at all. sulfur, oil 600 + 300 fold, and it was most economical considering operating cost. However, tomatoes should be noted that sulfur preparations should not be used in the shoots in the July to August high temperatures where weakness appears.

Key words : pepper; tomato: organic farming: organic material

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*Corresponding author: Tel:+82-063-238-6651

E-mail address: cwsky@korea.kr

1. 서언

최근 우리나라는 세계 농업강대국과 후발국과 본격적인 FTA가 가동되어 경영비, 안전성, 기능성에 따라 농산업의 운명이 결정될 시대에 접어들었다. 경영비의 경우 대중국 대비하면 고추는 6.5배로 상당한 차이가 있고, 다른 작물도 대부분 2∼6배의 심한 차이를 보이고 있다. 우리의 농업 국제경쟁력 제고방안 중 안전성을 높이기 위한 방법 중의 하나가 유기농업이다. 하지만, 대부분의 유기농자재의 병충해 방제가가 50~70%로 화학농약에 비하여 낮은 경향이다. 즉, 유기농업의 발전을 위해서는 병충해 방제에 효과가 높은 유기농자재의 개발이 시급한 실정이다. 전통적으로 유황 또는 유황합제를 이용한 병충해 방제 효과가 있다고 알려져 있으나 철, 비닐을 부식시키는 등의 약해가 심하여 사용에 상당한 제한이 있었다. 하지만 유황에 열을 가하지 않고 화학반응을 통하여 조제된 유황합제(자닮유황), 오일합제(자닮오일, 일명 천연유화제)가 발명되어 채소, 과수 등의 여러 가지 작물에 대하여 다양한 병충해 방제효과가 검토되고 있다(Jo. 2012). 앞으로 작물별, 병해충별로 유황합제, 오일합제의 사용법이 구명되면, 유기농업은 물론 나아가 인류농업의 발전을 위한 농자재의 신기원이 될 것으로 예측되어진다. 최근에 0.05% 유황합제는 토마토 흰가루병에 70∼95%방제효과가 있다고 보고되었으며(Sim et al., 2014), 유기농자재 연구는 Hong 등(2014)이 고추 역병 방제에 미생물 농약과 유기합성 살균제를 사용농도의 절반으로 혼용 처리한 결과 70.3-70.9%의 방제가를 보여 살균제 단독 처리와 유사한 방제효과를 확인하였다. 또한 유기합성 살균제와 유기농업자재를 7일 간격으로 2회씩 교호 살포하게 되면 화학농약의 살포횟수 및 사용량을 절감 할 수 있는 가능한 방안으로 추천할 수 있을 것이다(hong et al., 2015). 또한, 길항균과 살균제를 혼합처리하면 고추 역병의 방제효과를 높일 수 있다고 하였다(Kim et al., 1991). 인삼의 탄저병에 석회유황합제가 가장 방제효과가 높았고 황토유황합제(20∼400배액)도 농도 순으로 효과가 있다고 보고되었다(Lim et al., 2015). 또한, 양파에 수확직후 유황처리는 탄수화물, 단백질, 조회분, 지방 등의 일반성분과 플라보노이드 등의 항산화 성분이 상대적으로 높았다고 보고하였다(Jo and Surh. 2016). 유황합제는 병충해뿐만 아니라 성분함량에 효과가 있어 미래에 이용확대가 기대되어 21c는 유황의 시대라고 예측하기도 한다.

유기농자재를 이용한 안전성 향상기술은 앞으로 고추산업의 주요관건이며 고추재배에 있어 피해가 많은 해충 중의 하나가 담배나방이다. 담배나방은 수원지방의 경우 전체 발생기간은 5월 하순~10월 상순까지이고, 각 세대의 발생 최성기는 6월초∼9월초에 3번에 걸쳐 발생하는데 피해는 6월초에 나타나기 시작하여 9월초에 최고조에 이르며 발생량은 해마다 상당히 다르다고 보고되었다(Yang et al,. 2004. Hwang. 1987). 담배나방은 고추열매 속에 들어가 가해하기 때문에 화학농약 방제로도 어렵고 피해열매는 바로 떨어지며 피해를 본 열매는 상품화가 될 수 없다. 담배나방의 피해는 토마토 또한, 유사한 실정이다. 고온기 비가림재배 시 고온성 해충인 담배나방, 온실가루이, 진딧물, 응애 등 충해발생이 심한 실정이다. 따라서 주요채소 중, 고추는 담배나방, 진딧물을 대상으로, 토마토는 온실가루이를 대상으로 고온성 해충방제를 위한 유기농자재의 적정 농도를 구명하고자 수행하였다.

재료 및 방법

<시험1> 자닮유황합제(자닮유황)는 100L 내열성 플라스틱 PE용기(만능용기)에 유황(99.9%) 25kg, 가성소다(NaOH, 98%) 20kg, 천일염 1.5kg, 황토분말 500g, 천매암분말 500g 을 순서대로 넣고 물 50L를 추가한 후 나무막대로 전체를 고루 천천히 혼합하였다. 20분 정도 되면 화학반응 과정을 거쳐 다 녹는다. 녹은 후 32L의 물을 더 추가하여 고추 저어주고 1-3일 동안 침전 시킨 후 침전물을 제외하고 두꺼운 플라스틱 용기에 담아 밀봉하여 사용하였다(Jo. 2012).

자닮오일합제(천연유화제)는 100L 내열성용기(만능용기)에 가성가리(KOH, 90%) 3.2kg, 물은 1차로 2.5L를 넣고 뚜껑을 닫은 다음 비스듬히 돌리면서 완전히 녹인다. 물은 연수를 사용해야 한다. 카놀라유 18L를 넣고 전기드릴로 묽은 마요네즈처럼 되기까지 교반한다. 뚜껑을 닫은 후 3일간 숙성시키면 버터처럼 굳어진다. 20L의 물을 추가하고 전기드릴로 용기 바닥에 붙어있는 덩어리를 떼어내 교반한다. 물 60L를 추가하여 깨끗한 막대를 이용하여 수시로 용기바닥까지 전체를 저어주고 24시간 동안 두면 투명한 용액으로 완성된다(Jo. 2012).

시험재료는 고추 “슈퍼마니따” 품종을 이용하여 완주지방에서 3월25일 파종하였고 5월29일 정식하였다. 실험포장에서 자연 발생되는 담배나방, 진딧물 방제방법을 구명하기 위하여 처리는 대조, 유황제제(300, 400, 500, 600배액), 오일제제(50, 100, 200, 300배액), 유황제제+오일제제(300+50, 400+100, 500+200, 600+300배액), 오일제제+은행잎추출물(100+100), 유황제제+오일제제+은행잎추출물(400+100+100배액), 유황제제+오일제제+은행잎추출물(400+100 +200배액)을 살포한 다음, 1일후 진딧물, 담배나방의 방제가를 조사하였다. 시험구배치는 난괴법 3반복으로 하였다.

<시험2> 시험재료는 토마토 “미니찰” 품종을 이용하여 완주지방에서 3월25일 파종하였고 5월27일 정식하였다. 실험포장에서 자연 발생되는 온실가루이 방제방법을 구명하고자 처리는 대조, 유황제제(300, 400, 500, 600배액), 오일제제(50, 100, 200, 300배액), 유황제제+오일제제(300+50, 400+100, 500+200, 600+300배액)을 13처리한 다음, 1일후 방제가를 조사하였다. 시험구배치는 난괴법 3반복으로 하였다.

- 농도장해 발생률(%)=농도장해 발생엽수/전체 엽수×100

- 이병률(%)=발병 엽수/전체 엽수×100

- 방제가(%)=((무처리 발생율-처리구 발생율)/무처리 발생 율)×100

결과 및 고찰

<시험1> 진딧물 발생이 발생된 후 유기농자재 처리한 결과 생육초기에는 오일 단용으로 100배이상 처리구에서 방제가가 100%로 나타났고 오일 200~300배 처리에서도 방제가가 90%이상으로 나타났다. 오일+유황 혼합처리에서도 오일의 희석배수에 따라 방제가가 영향을 받는 것으로 나타나 결국은 오일단용 처리결과와 같은 경향이었다. 생육 중기에는 오일 100배 이상 고농도 처리에서 방제가가 90% 정도로 나타났고 유황+오일 혼합처리에서도 같은 경향이었으나 오일+은행나무잎 추출물 처리에서 방제가가 97% 이상으로 높았다. 기내에서는 오일 100배 이상 처리에서 방제가가 100%로 나타났고 오일+유황 혼합처리에서 오일 단용처리에 비하여 약간 높았으며 은행잎 추출물 추가하면 방제가가 약간 높아지는 것으로 나타났다. 선행 연구된 살충비누+25% 야자지방산(유기농자재)을 고추 진딧물에 처리할 경우 50배에서 5일 간격 2회처리 후부터 고추에 발생하는 진딧물에 대한 방제가가 92%이상이 되었으며, 100배액에서는 5일 간격 3회처리 후부터 94%의 방제가를 나타냈다고 보고하였다(Lee et al., 2002). 또한 난황유 단독은 진딧물에 대해 53.2 %의 방제가를 보였으나 neem오일+난황유 혼합물(20ppm)은 96.3 %의 높은 방제가를 보였다(Jee et al., 2010). 선행연구는 대부분 2회 이상 살포하였을 때, 방제가가 높아진 것을 알 수 있었다. 따라서 본 연구의 진딧물에 대하여 고추 생육기별 1회 처리결과로 고추재배에서 진딧물 방제의 효과적인 방제가를 보였다고 생각되었다. 유황단용 처리는 농도에 따라 40~77%로 나타나 오일단용 처리보다 낮았으나 일정한 효과가 있으며 혼합처리에서 약간의 상승작용이 있다고 생각되었다(Table 1). 한편, 표에는 나타내지 않았지만 처리간 고추의 생육차이는 없는 것으로 나타나 유황, 오일 농자재가 생장에는 영향을 미치지 않는 것으로 판단되었다.

담배나방 방제실험에서는 유황+오일(400+100배액) 등 처리에서 3회 방제 후 완전방제가 된 것으로 나타났고, 유황400배+오일100+은행잎 처리에서도 방제가가 높았으나 은행잎의 방제효과는 정확히 알 수 없었다. 결국 오일, 유황제제의 사용요령은 해충발생이 되지 않았을 때는 저농도로 예방하다가 해충이 발생하면 고농도로 살포하는 것이 효과적이고 경제적 측면에서 유리할 것으로 생각되었다(Table 2). 한편, 유기농 병충해 방제는 주로 저녁이나 흐린 날 살포하는데, 그 이유는 유기약제의 효과를 높이기 위해서 이다. 일몰 후 방제를 하면 4시간 이상 약제가 마르지 않아서 약효가 있는 것으로 알려져 있다. 고추의 담배나방 방제는 직사광선이 없는 저녁이나 흐린 날 처리해야 효과가 있고, 1~2일 간격으로 살포하는 것이 중요하다고 생각되었다. 그 이유는 담배나방이 고추과실에 들어가 있을 때는 사실상 방제가 어려우나, 1~2일 사이에 다른 고추열매로 이동하는 시간에 방제가 되는 것으로 생각되었다. 고추는 본 실험에서 유황300배의 고농도에서도 약해가 전혀 나타나지 않았지만, 주간에 직사광선이 있을 때 고농도로 살포하면 일부 잎에서 엽소현상이 나타나는 것으로 알려져 있다. 따라서 유황제제의 사용요령은 직사광선이 없는 저녁이나 흐린 날 살포해야 한다(Table 1,2). 한편 앞으로 고추에 병접종을 하여 오일+유황제제의 병충해 예방효과를 검토해야 할 것으로 생각되었다. 그 이유는 같은 동년도 실험포장에서 매주 1~2회 유황+오일제제를 살포하면서 실험을 하였는데, 본 실험포에서는 온실가루이, 응애 등 해충뿐만 아니라 탄저병, 곰팡이병이 전혀 발견되지 않았지만, 가까운 고추 실험포장에서는 모두 심하게 발생하였기 때문이다.

<시험2> 토마토의 농자재 처리에 따는 생육차이는 초장, 엽장, 엽폭, 마디수, 화방수 등에서 통계적 유의성은 없는 것으로 나타나 결국은 오일, 유황, 은행잎 처리는 생장에는 영향을 미치지 않은 것으로 나타났다(Table 3). 토마토에 발생하는 온실가루이는 유황600+오일300배 이상의 농도로 3회 살포하면 100% 방제되는 것으로 나타났고, 유황 또는 오일 단용처리에서는 유황400배, 오일100배 고농도에서 완전방제가 되었다. 한편, 선행연구에서 유기농자재인 미생물 제제와 난황유 효과를 조사한 결과, 토마토 회색 곰팡이 및 토마토 잎곰팡이에 대한 미생물 제제의 방제 값은 각각 49.0~55.9% (회색 곰팡이), 39.2 ~ 58.2% (잎 곰팡이)이었다. 토마토 흰가루병에 대한 난황유 혼합물의 대조구 값은 97.6 %를 보였다(Hong et al., 2012). 토마토 흰가루병에 대하여 P. polymyxa CW균주 배양액을 106, 107, 108 cfu/ml 농도로 희석하여 처리한 결과, 무처리의 병반면적율이 56.3%인데 비하여 0.03, 19.5, 45.7%로 병 발생을 현저히 억제하는 것으로 나타났다(Kim et al., 2013). 또한, 토마토 잿빛곰팡이병에 대해 EXTN-1과 Bacillus subtilis strain B17을 정식시 점적관수와 2주 간격 관주처리 2회 및 착화 초부터 경엽처리 4회를 한 결과 방제가가 57.0%와 55.1%로 가장 높았다(Kim et al., 2012). 이처럼 토마토에 대한 온실가루이 등 충해연구는 발표되지 않았기 때문에 직접적인 비교가 어려웠다. 비록 온실 가루이가 아닌 병해반응에 대한 연구지만, 선행연구 방제가 보다 본 연구재료의 유황+오일 합제의 방제가가 높은 경향으로 실효성있는 유기농자재로 보다 더 많은 작물과 병충해 방제연구가 필요하다고 생각되었다. 농자재 살포처리를 1회 늘일 때마다 온실가루이 개체수가 단계적으로 줄어드는 것으로 나타났는데, 고추의 담배나방 방제처럼 1~2일 간격으로 3회 연속살포 하는 것이 방제효율을 높이는 방법이라고 생각되었다(Table 4). 본 실험에서 토마토는 유황 300배의 고농도에서도 약해가 나타나지 않았다. 한편, 유황, 오일 300+100배액, 400+200배액에서 식물체 전체살포 처리에서는 약해가 발생하였으나 화뢰부위 이하의 처리에서는 약해발생 하지 않았으며 특히 유황제제의 약해는 7∼8월 고온기에 나타나기 때문에 이 시기에는 신초부분의 화뢰에는 사용하지 않아야 한다고 발표하였다(Nam et al., 2015b). 따라서 유황제제의 사용요령은 직사광선이 없는 저녁이나 흐린 날 살포해야 한다고 판단되었다. 유황의 약해문제는 앞으로 더 연구해야 하는데, 유황을 지속적으로 사용하면 포도, 감, 호두 등의 작물에서 농도에 민감하여 유황의 농도에 주의해야 한다고 보고하였다(Cho. 2012). 한편 앞으로 토마토에서도 병 접종을 하여 오일+유황제제의 병충해 예방효과를 검토해야 할 것으로 생각되었다. 그 이유는 고추실험에서와 같이 동년도 실험포장에서 매주 1~2회 유황+오일제제를 살포하면서 실험을 한 결과, 본 실험포에서는 온실가루이를 제외한 담배나방 등의 해충뿐만 아니라 잎곰팡이병 등이 전혀 발견되지 않았기 때문이다. 나아가 유황합제는 고추, 토마토 등의 작물에서 다양하게 나타나는 병해충 방제에 효과가 있는 것으로 나타나고 있다. 따라서 작목별, 병해충별 적정농도를 구명한다면, 친환경 농자재의 도약이 될 것으로 고무적인 결과를 보였다.

초 록

본 연구는 유기농 고추, 토마토 재배에서 유기농자재를 이용한 해충방제를 위하여 수행하였다. 시험1은 고추“슈퍼마니따” 품종을 이용하여 담배나방, 진딧물 방제를 위하여 대조구, 유황제제(300, 400, 500, 600배액), 오일제제(50, 100, 200, 300배액), 유황제제+오일제제(300+50, 400+100, 500+200, 600+300배액), 오일제제+은행잎추출물(100+100), 유황제제+오일제제+은행잎추출물(400+100+100배액), 유황제제+오일제제+은행잎추출물(400+100+200배액)을 살포한 다음 1일후 진딧물, 담배나방의 방제가를 조사하였다. 담배나방은 유황+오일(400+100배액) 등의 고농도 처리에서 3회 방제 후 완전방제가 된 것으로 나타났고, 진딧물은 대조구(일반 비가림시설)에서는 만연하였으나 오일+은행(100+100배액) 처리구 등의 고농도 처리에서 3회 처리 후 완전방제(기내 방제가 100%) 되었다. 오일, 유황제제의 사용요령은 해충발생이 되지 않았을 때는 저농도로 예방하다가 해충이 발생하면 고농도로 살포하는 것이 효과적이고 경제적 측면에서 유리할 것으로 생각되었다. 시험2는 토마토 “미니찰” 품종을 이용하여 온실가루이 방제를 위하여 대조구, 유황제제(300, 400, 500, 600배액), 오일제제(50, 100, 200, 300배액), 유황제제+오일제제(300+50, 400+100, 500+200, 600+300배액)을 살포한 다음 1-3일후 진딧물, 담배나방의 방제가를 조사하였다. 토마토의 온실 가루이는 3회 방제하면 완전방제 되었으나 1∼2일 간격으로 연속방제 하는 것이 유리한 것으로 생각되었다. 고온성 해충인 온실가루이가 수차례 발생하여 주기적으로 방제 처리한 결과, 담배나방이 전혀 발생하지 않은 것으로 나타나 간접적인 효과가 있는 것으로 생각되었다. 유황, 오일 600+300배액 처리에서 효과가 있고 경영비를 감안하면 가장 경제적이었다. 다만, 토마토에서 주의할 것은 약해가 나타나는 7∼8월의 고온기에는 신초부분에 유황제제를 사용하지 않아야 한다.

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Table 1. The control effect of aphid as affected by agricultural materials of organic farming in pepper.

treatments (sulfur+oil)		control value of aphid (%)
		field test(growth step)		in vitro
		early	metaphase- anaphase
control		0d	0d	0d
sulfur	sulfur 300	50.1c	77.6c	50.0c
	sulfur 400	45.3c	68.2c	45.2c
	sulfur 500	45.0c	68.3c	45.0c
	sulfur 600	40.6c	60.0c	39.5c
oil	oil 50	100a	91.2b	100a
	oil 100	100a	90.0b	100a
	oil 200	90.7b	90.0b	90.3b
	oil 300	90.2b	90.0b	90.0b
sulfur+oil	sulfur300+oil50	100a	93.4b	100a
	sulfur400+oil100	100a	92.0b	100a
	sulfur500+oil200	90.2b	93.3b	100a
	sulfur600+oil300	90.3b	90.0b	98.5b
Oil+leaf of ginkgo	Oil 100+ginkgo100	-	98.1a	100a
Sulfur+Oil+leaf of ginkgo	sulflur400+O100+Gz100	-	99.2a	100a
Sulfur+Oil+leaf of ginkgo	sulfur400+O100+G200	-	97.4a	100a
DMRT 0.05z		*	*	*

z: Means separation within columns by Duncan's multiple rage test(p≤0.05)

Table 2. The degree of occurrence oriental tobacco budworm(OTB) and  control result as affected by agricultural materials of organic  farming in pepper.

treatments (sulfur+oil)		degree of occurrence	one spray	two spray	tree spray
		(0-5)z
control		3	5.0a	5.0a	5.0a
sulfur	sulfur 300	3	3.3b	3.7b	3.7b
	sulfur 400	3	3.7b	3.7b	4.0b
	sulfur 500	3	3.3b	4.7a	4.7a
	sulfur 600	3	3.3b	4.7a	5.0a
oil	oil 50	3	3.3b	3.3b	4.7a
	oil 100	3	3.7b	3.7b	4.7a
	oil 200	3	5.0a	5.0a	5.0a
	oil 300	3	2.0c	1.0e	5.0a
sulfur+oil	sulfur300+oil50	3	2.3c	1.0e	0.0d
	sulfur400+oil100	3	2.7c	2.3c	0.0d
	sulfur500+oil200	3	4.0b	2.7c	1.3c
	sulfur600+oil300	3	2.0c	1.0e	1.3c
Oil+leaf of ginkgo	Oil 100+ginkgo100	3	2.3c	1.0e	0.0d
Sulfur+Oil+leaf of ginkgo	sulflur400+O100+Gy100	3	2.3c	1.3e	0.0d
Sulfur+Oil+leaf of ginkgo	sulfur400+O100+G200	3	2.3c	1.7d	0.3d
DMRT 0.05x		ns	*	*	*

z: 0:not occurrence, 1: very little, 2: a little,  3: middle, 4: severe,  5: very severe

y: ginkgo

x: Means separation within columns by Duncan's multiple rage test(p≤0.05)

Table 3. The growth characteristic as affected by agricultural materials of organic farming in tomato.

treatments (sulfur+oil)		plant height	leaf length	leaf width	no. of node	no. of flower truss
		(㎝)	(㎝)	(㎝)
control		230.1a	46.1a	33.8a	33.6a	10.0a
sulfur	sulfur300	236.2a	46.5a	34.5a	33.0a	10.2a
	sulfur400	237.5a	47.1a	35.1a	32.9a	9.5a
	sulfur500	229.3a	46.0a	36.7a	31.6a	9.7a
	sulfur600	224.1a	44.3a	35.0a	32.7a	9.7a
oil	oil50	231.7a	46.7a	35.0a	32.9a	9.8a
	oil100	231.7a	45.3a	35.5a	33.2a	9.7a
	oil200	229.9a	46.3a	35.3a	31.7a	9.2a
	oil300	238.7a	48.3a	35.3a	33.7a	9.8a
sulfur+oil	sulfur300+oil50	233.3a	46.9a	33.5a	32.8a	10.3a
	sulfur400+oil100	236.6a	47.3a	34.9a	32.9a	10.2a
	sulfur500+oil200	230.6a	47.3a	34.1a	32.1a	9.8a
	sulfur600+oil300	233.6a	48.2a	35.3a	32.7a	9.3a
DMRT 0.05z		ns	ns	ns	ns	ns

z: Means separation within columns by Duncan's multiple rage test(p≤0.05)

Table 4. The degree of occurrence of greenhouse whitefly and  control result as affected by agricultural materials of organic  farming in tomato.

treatments (sulfur+oil)		degree of occurrence	control times
		(0-5)z	one spray	two spray	tree spray
control		3	3.7a	5a	5a
sulfur	sulfur300	3	2.3b	1b	0c
	sulfur400	3	2.0b	1b	0c
	sulfur500	3	2.0b	1b	1b
	sulfur600	3	2.0b	1b	1b
oil	oil50	3	2.0b	1b	0c
	oil100	3	2.0b	1b	0c
	oil200	3	2.0b	1b	1b
	oil300	3	2.0b	1b	1b
sulfur+oil	sulfur300+oil50	3	2.0b	1b	0c
	sulfur400+oil100	3	2.0b	1b	0c
	sulfur500+oil200	3	2.0b	1b	0c
	sulfur600+oil300	3	2.0b	1b	0c
DMRT 0.05y		ns	*	*	*

z: 0:not occurrence, 1: very little, 2: a little,  3: middle, 4: severe,  5: very severe

y: Means separation within columns by Duncan's multiple rage test(p≤0.05)